高速离心机在质粒提取中的重要应用
时间：2018-05-07
|
来源：四川蜀科仪器有限公司
质粒是基因工程中最常用的运载体，担负着将目的基因转移到宿主细胞中的重要使命。高速离心机对从细菌中分离质粒有非常重要的作用。以下是一实验室质粒提取的步骤，使用蜀科TD-20高速离心机进行操作：
1、将扩增好的菌液重悬，转入1.5mL离心管中；
2、用质粒小量抽提试剂盒，按说明书要求提取质粒；
3、细菌高速离心1min,彻底去除上清；
4、加入250ulRB溶液，振荡器充分悬浮细菌；
5、加入250ulLB溶液。立即上下颠倒10次，使细菌裂解，室温，放置2min；
6、加入250ulNB溶液。立即上下颠倒10次，使之充分中和，室温，放置2min；
7、室温，15000rpm，蜀科高速离心机离心15min；
8、将吸附柱放入收集管内，离心得到的上清转移至吸附柱，室温，15000rpm，蜀科高速离心机离心30s；
9、弃废液，将吸附柱放入收集管，加入700uL WB溶液到吸附柱中，15000rpm，蜀科高速离心机离心30s；
10、重复上一操作；
11、将吸附柱放入干净的1.5mL离心管中，加30-50uL预热的Elution Buffer，室温，放置2min，高速离心1min；
12、样品进行电泳检测：1%琼脂糖凝胶电泳，上样量为2uL，紫外灯下观察，最明亮的带为超螺旋形式，可以在一定程度上表明提取质粒的纯度。
质粒提取是基因工程最基础的一步，高速离心机的运用非常频繁，蜀科高速离心机全系采用转头识别技术，有效防止转头超速运转，保护机器和人员安全，技术性能位居行业前列，欢迎选购！
2、用质粒小量抽提试剂盒，按说明书要求提取质粒；
3、细菌高速离心1min,彻底去除上清；
4、加入250ulRB溶液，振荡器充分悬浮细菌；
5、加入250ulLB溶液。立即上下颠倒10次，使细菌裂解，室温，放置2min；
6、加入250ulNB溶液。立即上下颠倒10次，使之充分中和，室温，放置2min；
7、室温，15000rpm，蜀科高速离心机离心15min；
8、将吸附柱放入收集管内，离心得到的上清转移至吸附柱，室温，15000rpm，蜀科高速离心机离心30s；
9、弃废液，将吸附柱放入收集管，加入700uL WB溶液到吸附柱中，15000rpm，蜀科高速离心机离心30s；
10、重复上一操作；
11、将吸附柱放入干净的1.5mL离心管中，加30-50uL预热的Elution Buffer，室温，放置2min，高速离心1min；
12、样品进行电泳检测：1%琼脂糖凝胶电泳，上样量为2uL，紫外灯下观察，最明亮的带为超螺旋形式，可以在一定程度上表明提取质粒的纯度。
质粒提取是基因工程最基础的一步，高速离心机的运用非常频繁，蜀科高速离心机全系采用转头识别技术，有效防止转头超速运转，保护机器和人员安全，技术性能位居行业前列，欢迎选购！
- 上一篇：蜀科高速离心机在农药残留鉴定中的应用
- 下一篇：蜀科高速冷冻离心机在质粒纯化中的应用
热门产品推荐：
