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蜀科高速冷冻离心机在DNA提取中的重要作用

时间:2018-05-16 | 来源:四川蜀科仪器有限公司
   DNA提取的生物样品分离实验,在基因工程和蛋白质工程等分子生物学领域和司法鉴定领域应用极广。在DNA提取中,高速冷冻离心机发挥着重要的作用,因其中最关键的一点是温度的控制。
   以实验为例,在细胞的细胞核中,DNA与蛋白质结合形成染色体,因此提取DNA时既要将蛋白质等物质除尽,又要尽可能保持DNA分子的完整性,即保持DNA带不发生断裂,无外源核酸污染。实验在4℃和常温条件下分别进行。4℃条件下采用高速冷冻离心机,而常温条件采用小型台式高速离心机,实验结果显示,4℃条件提取的DNA条带整齐无拖带,而常温提取的DNA有明显的拖带现象,表明前者的DNA片段完整无断裂,未被污染,且分子大小相同,而后者的DNA有部分已断裂。在本实验采用的有机法中,由于酚类容易被氧化,产生醌、二羧酸等氧化物,可破坏核酸中的磷酸二酯键,并引起DNA链的交联,常温条件下由于离心机转子高速旋转产生大量热,加速了酚的氧化,并增加了血液中细胞释放的内源核酸酶的活性,导致部分基因组DNA降解。而在4℃条件下提取的DNA由于温度低,酚不易被氧化,内源核酸酶活性较低,因此能够保证DNA的完整性。
  同理,对生物活性保留要求很苛刻的技术项目,离心萃取的温度都需要严格符合要求,超过温度区间范围会对活性酶的指标有影响或者温度过低导致凝结。
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